探討外周血單個核細胞的凍存及復蘇工藝,實現外周血單個核細胞的長久保存。
液氮罐
冷凍保存1、2、4、8、12和24個月后復蘇細胞:取出凍存管,迅速投入37℃水浴中,并不斷輕輕搖動,保證管內液體在1min內80%溶解,將細胞吸到6-8mlDMEM洗滌液中,并洗滌凍存管1次,移入50ml離心管中,233×g離心5min。棄上清,加入6ml培養液,輕輕混勻,留取500μl數測細胞活性。
液氮罐
體外人工分離的外周血單個核細胞經過長時間冷凍保存后仍可維持其高活性,并可誘導生成具有抗腫瘤活性的細胞群,該結果對單個核細胞保存、擴增活化的自體淋巴細胞的應用具有重要意義。